細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞是生命活動的基本結(jié)構(gòu)和功能單位，細(xì)胞水平的實(shí)驗(yàn)技術(shù)手段在生命科學(xué)研究中充當(dāng)了至關(guān)重要的角色，尤其在動植物遺傳和發(fā)育的科研領(lǐng)域發(fā)揮了不可或缺的作用。赫貝搭建細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺可提供專業(yè)的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)以及細(xì)胞生物學(xué)類整體實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)。服務(wù)項(xiàng)目涵蓋了從細(xì)胞培養(yǎng)、質(zhì)粒轉(zhuǎn)染，到細(xì)胞建模、樣本收集，到細(xì)胞生物學(xué)功能檢測整個(gè)科研流程，并可搭配分子生物學(xué)、慢病毒感染、蛋白組學(xué)、基因芯片、動物建模、免疫學(xué)，病理學(xué)等，實(shí)現(xiàn)整個(gè)課題項(xiàng)目的研發(fā)。

細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)服務(wù)

細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù)，即對離體細(xì)胞在體外模擬體內(nèi)環(huán)境，使之繼續(xù)生存、生長、繁殖的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生物技術(shù)中核心、基礎(chǔ)的技術(shù)。赫貝提供多種細(xì)胞株的培養(yǎng)，并可從人、大小鼠、兔及其它動物組織中，對原代細(xì)胞進(jìn)行分離、培養(yǎng)和鑒定。

1、原代細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)（周期：4-6周）

原代細(xì)胞培養(yǎng)是指將機(jī)體的各種組織從機(jī)體中取出，經(jīng)各種酶（常用胰酶）、螯合劑（常用EDTA）或機(jī)械方法處理，分散成單細(xì)胞，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞得以生存、生長和繁殖。原代培養(yǎng)細(xì)胞離體時(shí)間短，性狀與體內(nèi)相似，適用于研究。一般說來，幼稚狀態(tài)的組織和細(xì)胞，如：動物的胚胎、幼仔的臟器等更容易進(jìn)行原代培養(yǎng)。

2、細(xì)胞轉(zhuǎn)染（周期：4-8周）

常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類，一類是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（性轉(zhuǎn)染）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，雖然可以達(dá)到高水平的表達(dá)，但通常只持續(xù)幾天，在轉(zhuǎn)染后24-72小時(shí)內(nèi)分析結(jié)果。后者外源質(zhì)粒DNA整合到宿主細(xì)胞染色體上，使宿主細(xì)胞可長期表達(dá)目的基因及蛋白，需要在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染基礎(chǔ)上對靶細(xì)胞進(jìn)行篩選，篩選得到的細(xì)胞可穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白，用于蛋白的擴(kuò)增及富集；或得到穩(wěn)定沉默特定基因的細(xì)胞株。

赫貝提供細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染及穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù)，并可通過免疫熒光、PCR及Western Blot 驗(yàn)證基因及蛋白高表達(dá)。

3、細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性相關(guān)檢測（周期：3-4周）

細(xì)胞增殖的研究方法有很多，主要包括BrdU、EdU、CCK8、MTT等。赫貝主要使用MTT和CCK8兩種試劑測定細(xì)胞生長曲線，也提供Brdu和Edu染色通過流式細(xì)胞術(shù)鑒定細(xì)胞增殖能力。

4、流式細(xì)胞術(shù)檢測（FACS）服務(wù)（周期3-4周）

流式細(xì)胞術(shù)（flow cytometry, FCM)是一種可以對細(xì)胞或亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)進(jìn)行快速測量的新型分析技術(shù)和分選技術(shù)。其特點(diǎn)是①測量速度快；②可進(jìn)行多參數(shù)測量；③是一門綜合性的高科技方法（ 流式細(xì)胞術(shù)綜合了光學(xué)，電子學(xué)，流體力學(xué)，細(xì)胞化學(xué)，免疫學(xué)，激光和計(jì)算機(jī)等多門學(xué)科和技術(shù)）；④既是細(xì)胞分析技術(shù)，又是的分選技術(shù)。

赫貝可根據(jù)客戶實(shí)驗(yàn)方案對細(xì)胞進(jìn)行藥物刺激后通過單染（PI）或雙染（PI+Annexin V）細(xì)胞，利用流式細(xì)胞術(shù)（FACS）進(jìn)行細(xì)胞周期或者細(xì)胞凋亡檢測，同時(shí)可進(jìn)行免疫細(xì)胞分型、細(xì)胞分選、表面抗原鑒定等服務(wù)。

5、細(xì)胞遷移與侵襲（Transwell）（周期4-8周）

細(xì)胞遷移與侵襲是指將Transwell小室放入培養(yǎng)板中，小室內(nèi)稱上室，培養(yǎng)板內(nèi)稱下室，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔，將研究的細(xì)胞接種在上室內(nèi)，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)胞。赫貝提供多種不同孔徑和經(jīng)過不同處理聚碳酸酯膜，可幫助客戶進(jìn)行共培養(yǎng)、細(xì)胞趨化、細(xì)胞遷移和細(xì)胞侵襲等多種課題的研究。

6、細(xì)胞自噬（周期：2-3周）

細(xì)胞自噬是指一些需降解的蛋白質(zhì)和細(xì)胞器等胞漿成分被包裹，并終運(yùn)送至溶酶體降解的過程。自噬的研究已經(jīng)成為繼凋亡之后生物醫(yī)學(xué)熱門的領(lǐng)域之一，除維持生理狀態(tài)下機(jī)體的穩(wěn)態(tài)功能外，越來越多的研究表明自噬失調(diào)可能與腫瘤、感染、神經(jīng)退行性變等疾病相關(guān)。

赫貝采用先進(jìn)的透射電鏡觀察和免疫熒光檢測方法，可實(shí)時(shí)監(jiān)控自噬體產(chǎn)生和降解的全過程，還可通過對自噬通路的調(diào)控來評價(jià)自噬功能對細(xì)胞行為或機(jī)體功能的影響，如自噬抑制或激活劑、自噬相關(guān)基因的敲除及沉默等。

7、細(xì)胞劃痕（周期2-4周）

細(xì)胞劃痕（修復(fù)）法是簡捷測定細(xì)胞遷移運(yùn)動與修復(fù)能力的方法，類似體外傷口**模型，在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞上，用微量槍頭或其它硬物在細(xì)胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線，去除中央部分的細(xì)胞，然后繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至實(shí)驗(yàn)設(shè)定的時(shí)間（例如72h），取出細(xì)胞培養(yǎng)板，觀察周邊細(xì)胞是否生長（修復(fù)）至中央劃痕區(qū)，以此判斷細(xì)胞的生長遷移能力。與transwell相比，細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)具有經(jīng)濟(jì)、操作方便等優(yōu)勢。

8、其他細(xì)胞實(shí)驗(yàn)服務(wù)：

1、原位末端凋亡法（TUNEL）檢測

2、細(xì)胞毒理學(xué)試驗(yàn)服務(wù)

3、細(xì)胞藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

4、細(xì)胞分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

5、電鏡檢測

6、激光共聚焦顯微鏡檢測

7、熒光顯微鏡檢測