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產(chǎn)品詳情
簡單介紹:
甲基化分析:上海達為科生物,主營實驗技術服務,如想了解更多甲基化分析內(nèi)容,歡迎來電咨詢!
詳情介紹:
達為科優(yōu)勢
- 質量:可避免樣本偏差,在重亞硫酸鹽轉化步驟后得到更高的定量結果的數(shù)據(jù)質量;引物設計運算法專為甲基化研究而優(yōu)化,可提供更快的引物設計,及更高的PCR成功率
- 可以提供整個CpG島的每個CpG位點的甲基化信息
- 針對特定區(qū)域設計引物,而無需考慮甲基化狀態(tài)

原理
DNA甲基化是一種表觀遺傳修飾,它是由DNA甲基轉移酶(DNA methyl-transferase,
Dnmt)催化S-腺苷甲硫氨酸作為甲基供體,將胞嘧啶轉變?yōu)?-甲基胞嘧啶(mC)的一種反應,在真核生物DNA中,5-甲基胞嘧啶是存在的化學性修飾堿基。CG二核苷酸是主要的甲基化位點,它在基因組中呈不均勻分布,存在高甲基化、低甲基化和非甲基化的區(qū)域,在哺乳動物中mC約占C總量的2-7%。一般說來,DNA的甲基化會抑制基因的表達。DNA的甲基化對維持染色體的結構、X染色體的失活、基因印記和腫瘤的發(fā)**展都起重要的作用。
我們利用重亞硫酸鹽使DNA中未發(fā)生甲基化的胞嘧啶脫氨基轉變成尿嘧啶,而在適當?shù)膶嶒灄l件下甲基化的胞嘧啶保持不變,再進行PCR擴增,甲基化的位點可以被當作一個C/T的SNP來處理;可利用直接測序法來判斷是否CpG位點發(fā)生甲基化。
服務流程
- 客戶提供:待分析的基因組區(qū)域信息;用于提取基因組DNA的組織材料
- 基因組DNA的提取,利用瓊脂糖凝膠電泳明確所提基因組DNA的純度
- 亞硫酸氫鈉修飾基因組DNA:雙鏈DNA變性解鏈后,在HSO3-作用下,C若已有甲基化則無此改變;若DNA CpG島若無甲基化,則序列中的改變?yōu)镃→U,CG→UG
- 修飾后DNA純化回收,并進行引物特異性的PCR
- 對PCR產(chǎn)物進行測序并且與未經(jīng)處理的序列比較
- 我們提供:特異性位點的DNA甲基化的檢測結果